Extrém sebesség és nagy teljesítmény a KAPA2G(tm) Fast Taq polimerázzal

A KAPA2G™ Fast egy extrém sebességre tervezett második generációs DNS polimeráz. Az eredmény a világ leggyorsabb hőstabil DNS polimeráza teljesítménykompromisszum nélkül.

Lerövidíti a PCR reakcióhoz szükséges időt 30-70%-kal, nem csak fast thermal cyclereken.
Gyorsasága nincs a hozam rovására
Elongáció 1 másodperc/kilobázis sebességgel
Nem igényel speciális mintatartókat vagy készüléket

Termékleírás

A KAPA2G kifejezetten a PCR reakció teljesítőképességének növelésére, a DNS szintézis jelentős meggyorsítására tervezett hőstabil polimeráz enzim. KAPA2G Fast PCR Kit meglévő PCR módszerek gyors PCR módszerekké konvertálására alkalmas, az össz reakcióidő max. 70%-kal való csökkentésével. A KAPA2G Fast PCR Kit alkalmazása nem rontja a reakció teljesítményét és nem kívánja speciális készülékek, fogyóeszközök alkalmazását.

A KAPA2G Fast PCR Kittel elérhető futásidő csökkenés nem egyszerűen a reakciólépések lerövidítésén alapul, hanem az enzim azon képességén hogy a használatos Taq-oknál, polimerázoknál sokkal gyorsabban szintetizálja a DNS-t.

Hasonlóan a vad típusú taq-hoz a KAPA2G Fast DNA polymerase 5 -> 3 polimeráz és 5 -> 3 exonukleáz aktivitású enzim, 3 -> 5 exonukleáz (proofreading) aktivitás nélkül. Hűsége a natív Taq polimerázhoz hasonló. A szintetizált DNS polyA farokkal rendelkezik, mely TA klónozó vektorokba közvetlenül klónozható.

Teljesítmény

A KAPA2G-vel drámaian csökkenthető a primer extenzió; 2-5kb méretű amplikonoknál 10 s/kb; 1-2kb méretű amplikonoknál 7,5 s/kb míg 1 kb-nál kisebb templátoknál 1 s/kb extenzió sebesség biztonságosan használhatók kivételes hozam mellett.

Nagy fragmentek amplifikálásánál, azonos körülmények között az 1 kb/min extenziós sebességű Taq nem tudja nyújtani azt a hozamot és érzékenységet, mint a KAPA2G.

Rövidebb extenziós időknél a Taq polimeráz teljesítménye drasztikusan csökken, ami gyors PCR protokollokban limitálja a vad típusú Taq polimerázzal elérthető időnyereséget. 5 kb-os fragment esetén a KAPA2G-vel 50-67%-os időnyereség érhető el további optimalizálás nélkül. 1kb vagy kisebb méretű fragmentek esetén mindössze 1 másodperces primer extenzió elegendő egyetlen target kópia reprodukálható amplifikációjához.

Egyetlen másodperces (!) elongációs lépés a KAPA2G Fast Taq használatával

1 kb humán genomi DNS fragmentből készült 10x hígítási sor amplifikációja a KAPA2G Fast PCR kit-tel, ciklusonként mindössze 1 másodperces (!) elongációs lépéssel. Csupán az extenziós lépés csökkentésével a teljes reakcióidő 49%-kal redukálódott. További optimalizációval és gyors cyclerekkel a KAPA2G kittel rövid ampliconok rutinszerűen szaporíthatók fel 20 perc alatt.

25 uL-es reakció, 0,5 U/reakció enzim felhasználásval.

A KAPA2G Fast PCR Kit tartalma

KAPA2G Fast DNA Polymerase (5 U/µl)
5x KAPA2G Buffer A with MgCl2
5x KAPA2G Buffer B with MgCl2
25 mM MgCl2
KAPA dNTP Mix (10 mM each nucleotide)