DNA Releasy példaalkalmazások

PCR HT-29 vastagbél carcinoma sejtekből:

Vélemény: A DNAreleasy optimalizálás nélkül is kitűnően teljesít. Használata nagyon egyszerű, és a KAPA 2G Robust HS enzimmel kombinálva nagyon jó eredményt ad.

PCR HT-29 vastagbél carcinoma sejtekből. Jelmagyarázat:

1. DNS marker

2. DNAreleasy lizátum, HT-29 vastagbél carcinoma sejttenyészetből, Kapa 2G Robust HS-tal amplifikálva

3. Kapa 2G Robust HS-tal amplifikált plazmid DNS

4. Kapa 2G Robust HS-tal amplifikált plazmid DNS és sejttenyészet lizátum

5. Negativ kontroll

6. DNSreleasy lizátum, HT-29 colon carcinoma sejttenyészetből, Kapa 2G Robust HS-tal amplifikálva egy másik primer alkalmazásával

7. Kapa 2G Robust HS-tal amplifikált plazmid DNS más primerrel

8. Kapa 2G Robust HS-tal amplifikált plazmid DNS és sejttenyészet lizátum más primmerel

9. Negativ kontroll ( Turku Egyetem, Pathológiai Intézet)

PCR egér farokból és fülből

A DNA releasy kit és a KAPA 2G Robust HS enzim ígéretes kombinációja.

Egérfarokból genomi DNS-t kinyerni, meglehetősen hosszadalmas procedura. A WEB-en közölt legtöbb protokoll egész éjszakás proteináz K-s inkubálást ajánl, a lízis lassú.

Ezideig a legjobb megoldásnak DNS tisztító oszlop használata után történő hot start PCR bizonyult. Ez nem annyira időigényes, mint a tradicionális módszer, de természetesen sokkal költségesebb.

A leghatékonyabb módszer a DNA releasy és a Kapa 2G Robust HS enzim kombinációja.

Egész éjszakás inkubálás egy másik kereskedelmi termékével

Proteináz K emésztés, egész éjszakás

DNAreleasy, 7 perces inkubálás

Egy 2mm-es egérfarok darabhoz 50 µl DNAreleasyt adtunk.

5 perc 75 °C-os inkubációt követően a lízis 2 perc volt 96 °C-on.

A PCR reakcióhoz 2 µl terméket adtunk (25 µl reakcióelegy), melyből 8 amplikont szaporítottunk fel Kapa 2G Robust HS ready mixszel.